进口的Abcam抗体大多价格昂贵,如保存不当除造成的经济损失以外还可能会导致实验的不成功,直接耽误科研工作的进展。那我们应该如何保Abcam抗体呢,让上海恒远于您一起来分享一下。
*、保存温度和条件
对于很多抗体而言,分装成小等份并冻存于-20℃或-80℃是*保存条件。分装成小等份可zui大程度减少由冻融造成的损伤,以及从单个试剂瓶中多次吸取而引入的污染。小等份只需冻融一次,如有剩余,可将剩余物保存于4℃。在收到抗体时,在10000×g下离心20秒以沉积截留于试剂瓶螺纹的溶液,并以小等份转移至低蛋白结合微量离心管中。小等份的量取决于实验人员在实验中通常采用的量。小等份应不小于10μl;等份越小,储液浓度因抗体蒸发及吸附于保存瓶表面而受到的影响越大。
在大多数情况下,收到抗体时在4℃下保存一至两周,然后再冷冻进行长期保存是可以接受的,但也许腹水液是例外,它可能包含蛋白酶,因而应该尽快冻存。同样,遵照数据表上的建议是重要的.
第二、用*防止污染
为了防止微生物污染,可将*加入抗体制备品中达到0.02%(w/v)的终浓度。很多abcam抗体已经包含这种防腐剂,所用浓度范围为0.02至0.05%。
第三、避免反复冻融
重复冷冻/融化循环可使抗体变性,导致其形成使抗体结合能力降低的聚集物。
保存于-20℃对于大多数抗体是适当的;保存于-80℃无明显优势。冰箱不能为无霜型。这些冷冻和融化之间的循环(以减少结霜)恰恰是应该避免的。出于相同原因,抗体试剂瓶应置于具有zui小温度波动的冰箱区域,例如朝冰箱后部放置而不是置于门架上。
有些研究人员加入冷冻保护剂甘油达到50%的终浓度以防止冷冻/融化损伤;甘油可将凝固点降低至低于-20℃。虽然这对于很多抗体是可接受的,但是只有一小部分我们提供的抗体测试了在该保存条件下的稳定性,并且我们的保证仅使用于按数据表上推荐的方式保存的抗体。不建议将包含甘油的溶液保存于-80℃,因为该温度低于甘油的凝固点。请注意甘油可被细菌污染。如果加入甘油或任何冷冻保护剂,则应当小心操作,以得到无菌制备物。
应避免抗体在稀释至工作浓度后在4℃下保存超过一天。蛋白质在高浓度下保存时一般不易降解,理想的浓度为1mg/ml或更高。这是在抗体溶液中加入蛋白质例如BSA作为稳定剂的理论基础。加入的蛋白质也有助于减少抗体因结合于容器壁上而造成的损失。对于打算进行偶联的抗体而言,由于稳定蛋白质会与抗体竞争,降低了偶联的效率,所以不应加入稳定蛋白质。
以上几点保存Abcam抗体的这些要求有哪几条您不知道?针对以上要求、方法,同样也适用于其他抗体,希望我们的这些建议对您的实验也帮助,上海恒远祝您实验成功。