放假之前,我公司夏赴实验技术部探讨学习酶免试剂盒产品的使用技术,根据夏的了解,总结出酶联免疫技术专家对实验产品的使用评议内容。
ELISA是一种十分常用的定性定量方法,人体和动物、体外细胞培养中超过80%蛋白定量都使用其作为检测的手段。使用试剂盒产品,需要仔细阅读说明书,对说明书的内容有一个详细的了解。一般来说:
一,试剂盒的名称:由“(物种)+(测定指标)+酶联免疫试剂盒(ELISA)",物种和测定指标不能搞错,否则买错了就是你的事情;另外有的试剂盒说明书试剂盒名称明显与写在试剂盒上的名称不符,这要引起你的警惕。
二,用途:应用于科研还是临床诊断,用于临床诊断的有卫生部的批准文号(上海恒远产品仅用于科研)。
三,测定原理:现在ELISA试剂盒除非是测定抗体的以外,一般使用的是双抗体夹心法,此种方法大多数用的是增强的双抗体夹心法,即使用生物素-亲和素系统,还有少数的指标可能使用竞争法,这类方法适用于半抗原的测定。具有复杂结构的多表位蛋白抗原,其双抗体夹心法中的一个抗体必须用单抗,否则背景很高。
当然如果两个都是单抗(这两个单抗针对不同表位),那么测定的线性范围就较宽,试剂盒性能就较好;一个用单抗,一个用多抗,测定的灵敏度会较高。某些简单的化合物用ELISA测定时,因为没有两个或以上的表位,一般只能作为半抗原,只能用竞争法测定。如果您发现有测定简单化合物用双抗体夹心法作测定原理时,这个试剂盒你就要怀疑了。
四,试剂盒的组成