一项酶联免疫试剂盒实验的准备有着这样那样的要求,在实验中除了试剂盒的准备还有缓冲剂、稀释液等等需要我们自己动手来配制,可是这些配制会对许多的实验新手朋友们会照成一个很大的困扰,所以今天上海恒远这里就来朋友们说一说实验中需用试剂的配制方法。
1、包被缓冲液:
NaHCO3 1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸馏水至1000ml
2、实验洗涤缓冲液(PH7.4 PBS):0.15M
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl 8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05% 0.5ml
加蒸馏水至1000ml
3、实验稀释液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗涤缓冲液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5~10%使用。
4、实验终止液(2M H2SO4):
蒸馏水178.3ml,逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。
5、底物缓冲液:
0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml
0.1M 柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸馏水50ml。
6、实验TMB使用液:
TMB(10mg/5ml无水乙醇) 0.5ml
底物缓冲液(PH5.5) 10ml
0.75%H2O2 32μl
7、实验ABTS使用液:
ABTS 0.5mg
底物缓冲液(PH5.5) 1ml
3%H2O2 2μl
8、实验封闭液:
牛血清白蛋白(BSA) 5克
加洗涤缓冲液至100ml。
上海恒远提醒注意事项:
实验操作中加入的缓冲液和各组分一定要,将洗涤液加入酶标板中的时候防止加入的试剂混入另外一个酶标孔,严防交叉污染。
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