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利用生物学检测大肠杆菌有哪些方法
更新时间:2013-08-08      阅读:1400

利用生物学检测大肠杆菌有哪些方法 
 

肠埃希氏菌(E. coli)通常称为大肠杆菌,是Escherich在1885年发现的,在相当长的一段时间内,一直被当作正常肠道菌群的组成部分,认为是非致病菌。直到20世纪中叶,才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性,尤其对婴儿和幼畜(禽),常引起严重腹泻和败血症,它是一种普通的原核生物,根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为5类:致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠黏附性大肠杆菌(EAEC)。大肠杆菌属于细菌。

   传统的细菌分离、培养及生化反应,已远远不能满足对各种病原微生物的诊断以及流行病学的研究。随着现代科学技术的不断发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学及计算机技术的不断发展,新的微生物诊断技术和方法已广泛被应用。近来国内外学者不断努力,已创建不少快速、简便、特异、敏感、低耗且适用的微生物诊断方法,尤其是DNA探针和以PCR为代表的分子生物学技术的发展及自动化仪器的应用已明显加快了微生物检验的速度,明显提高了微生物的诊断水平。
 
    近年文献表明,核糖分型不能用来鉴定EHEC0157:H7血清型之间的菌株。脉冲场凝胶电泳(pulsed-fieldgelelectrophoresis,PFGE)和噬菌体分型是zui有价值的鉴定技术,PFGE作为一种DNA指纹图被广泛利用,且优于其他DNA分析方法,它已成功地应用于对部分菌落进行分类。
 
    将检查的VT基因型以PCR底物酶切后,经PFGE分析其限制性片段长度的多态性。Bohn和Karch用此法证实了德国一次流行的26个菌株为相似的谱型。苏格兰的Krause用此法分析的124个菌株,可分为12个噬菌体型,其中2型和49型占所研究噬菌体型的63.7%。
 
    据报道,现已确定66种噬菌体型,应用噬菌体分型在美国分出24个型,流行株以1型、2型、4型、49型为主。加拿大暴发分离的13个菌株和美国内布拉斯分离的3个菌株均为1型,美国北卡罗来那洲暴发分离的4个菌株为2型。因此,噬菌体分型对预测VT有一定的参考价值。不同的噬菌体产生VT的特点不同,既能产生VTl,又能产生VT2的有1型、8型、14型,而2型、49型只产生VT2。
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