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酸化血清溶血试验技术分析
更新时间:2013-04-01      阅读:2881
实验原理
  阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者的红细胞由于膜的缺陷,对补体的敏感性增加,这些对补体敏感的红细胞能被正常血清 所溶解,特别在血清 酸性条件下(pH6.4-6.5)经37℃孵育,溶血更明显。

实验方法
  材料:
  1.0.25mol/LHCL
  2.0.85%生理盐水
  3.离心机试管水浴 箱等
  方法:
  1.取静脉血2-3ml,取下针头,将血轻轻注入试管 中;
  2.离心吸出血清备用;
  3.将血块捣碎,用生理盐水洗涤3次,配成50%红细胞悬液备用;
  4.按下表进行操作;

待测管(ml)
对照管(ml)
0.5
/
0.025
0.025
/
0.5
0.05
0.05

  5.两管均加塞,置37℃水浴 箱中1h后直接观察或者离心后观察结果。
 
实验结果计算
  溶血为阳性,不溶血为阴性

注意事项
  1.本实验不用抗凝血,因抗凝剂会阻碍溶血,降低敏感性,出现假阴性;
  2.血清酸化后立即塞紧管口,以防二氧化碳逸出;
  3.血清需新鲜,以免补体失活,造成假阴性;
  4.实验用具要干燥,针头要粗,红细胞悬液要直接滴入液体,不要沿管壁流下,以免溶血。

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