1．原理
样品脱脂后，用水或乙醇提取，提取液经澄清处理以除去蛋白质等杂质，再用盐酸进行水解，使蔗糖转化为还原糖。然后按还原糖测定方法分别测定水解前后样品液中还原糖含量，两者差值即为由蔗糖水解产生的还原糖量，乘以一个换算系数即为蔗糖含量。
2．仪器
①25 mL古氏坩埚或G4垂融坩埚。
②真空泵。
③滴定管。
④水浴锅。
3．试剂
①6 tool·I。1盐酸溶液。
②5 mol·L叫氢氧化钠溶液：称取20 g氢氧化钠加水溶解并稀释至100 mL。
③l tool·L1氢氧化钠溶液：称取4 g氢氧化钠加水溶解并稀释至100 mI。
④费林试剂甲液：称取34．639 g硫酸铜（CuS（）4·5H20），加适量水溶解，加人0．5 mI硫酸，加水稀释至500 mL，用精制石棉过滤。
⑤费林试剂乙液；称取173 g酒石酸钾钠和50 g氢氧化钠，加适量水溶解并稀释到500 mL，用精制石棉过滤，贮存于橡皮塞玻璃瓶中。
⑥精制石棉：取石棉先用3 tool·I。叫盐酸浸泡2～3 h，用水洗净，再用10％氢氧化钠浸泡2～3 h。倾去溶液，再用碱性酒石酸铜乙液浸泡数小时，用水洗净，再以3 mol·L1盐酸浸泡数小时，用水洗至不呈酸性。加水振荡，使之成为微细的浆状软纤维，用水浸泡并贮存于玻璃瓶中，即可用于填充古氏坩埚。
⑦O．02 mol·I。q高锰酸钾标准溶液：称取3．3 g高锰酸钾溶于1 050 mL水中，缓缓煮沸20～30 min，冷却后于暗处密闭保存数日，用垂融漏斗过滤，保存于棕色瓶中。标定：称取150～200℃干燥1～1．5 h的基准草酸钠约O．2 g，溶于50 mI。水中；加80 mI。硫酸，用配制的高锰酸钾溶液滴定，接近终点时加热至70℃，继续滴至溶液呈粉红色30 s不褪为止。同时作空白试验。
⑧硫酸铁溶液：称取50 g硫酸铁，加人200 mL水溶解后加入i00 mL硫酸，冷却后加水稀释至1 000 mL。
⑨3 tool·L叫盐酸溶液：量取30 mI。浓盐酸，加水稀释至120 mL。
⑩甲基红乙醇溶液（O．1％）：称取0．1 g甲基红，用60％乙醇溶解并定容到100 mL。
4．操作步骤
①样品处理
a．乳类、乳制品及含蛋白质的食品：称取约0．5～2 g固体样品（吸取2～10 mL液体样品），置于250 mL容量瓶中，加50 mL水，摇匀。加入10 mL碱性酒石酸铜甲液、4 mLl tool·L叫NaOH溶液，加水至刻度，混匀。静置30 rain，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。（此步骤目的是沉淀蛋白质）
b．酒精性饮料：吸取100 mL样品，置于蒸发皿中，用1 tool·L一，NaOH溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积1／4后（注意保持溶液pH为中性），移人250 mL容量瓶中。加50 mL水，混匀。以下按a中从“加入10 mL碱性酒石酸铜甲液”起依次操作。
c．含淀粉多的食品：称取2～10 g样品，置于250 mL容量瓶中，加200 mL水，在45℃水浴中加热1 h，并时时振摇（此步骤是使还原糖溶于水中，切忌温度过高，因为淀粉在高温条件下会糊化、水解，影响测定结果）。冷却后加水至刻度，混匀，静置。吸取200 mL上清液于另一250 mL容量瓶中，以下按a中从“加入10 mI。碱性酒石酸铜甲液”起依次操作。
d．含有脂肪的食品：称取2～10 g样品，先用乙迷或石油醚淋洗3次，去除醚层。加入50mL水混匀，以下按a中从“加入10 mL碱性酒石酸铜甲液”起依次操作。
e．汽水等含有二氧化碳的饮料：吸取100 mL样品置于蒸发皿中，在水浴上除去二氧化碳后，移入250 mI一容量瓶中，并用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀后，备用。
②样品水解：吸取2份50 mI。样品处理液，置于100 mL锥形瓶中，一份加5 mL 6 mL叫盐酸，在68~70℃中水解15 min（如果温度过高或时间过长，一些大分子糖也会被水解）。冷却后加2滴甲基红指示剂，用5 tool·I．1氢氧化钠溶液中和至中性，转至容量瓶中，加水定容至100 mL，混匀，此液为样品水解液。另一份直接加水稀释至100 mL，此液未水解。
③样品测定：分别吸取②中样品水解液和直接加水稀释的溶液各50 mL，分别于两个400mL烧杯中，各加入25 mL碱性酒石酸铜甲液及25 mI。乙液，于烧杯上盖一表面皿，加热，控制在4 rain内沸腾，再准确煮沸2 rain，趁热用铺好石棉的古氏坩埚或G。垂融坩埚抽滤，并用60℃热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不呈碱性为止。将古氏坩埚或垂融坩埚放回400 mL烧杯中，加25 mL硫酸铁溶液及25 mL水，用玻棒搅拌使氧化亚铜*溶解，分别以0．1000tool·L_。高锰酸钾标准液滴定至微红色为终点。同时吸取50 mL水，加与测样品时相同量的碱性酒石酸铜甲、乙液，硫酸铁溶液及水，按同一方法做试剂空白实验。
5．计算
6．说明
①这里用的是高锰酸钾滴定法测定还原糖，也可用直接滴定法测定还原糖。
②蔗糖的水解条件远比其他双糖的水解条件低，在本方法规定的水解条件下，蔗糖可*水解，而其他双糖和淀粉等的水解作用很小，可忽略不计。
③用还原糖法测定蔗糖时，为减少误差，测得的还原糖含量应以转化糖表示。因此，选用直接滴定法时，应采用0．1％标准转化糖溶液标定碱性酒石酸铜溶液。
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更新时间：2012-11-07 
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