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如何做好ELISA实验?
更新时间:2021-01-29      阅读:1078
在生产过程中,不同批次的试剂的质量,保证*一致非常困难,ELISA试剂盒甚至通过批检验项目和结果也不同,因此必须选择和订购试剂长批次,并确保小鼠ELISA试剂盒保存条件。严格执行本标准可以避免因试剂批号变化与质量控制系统和复杂的过程,重新评价试剂重新建立,并能保证结果的稳定性;有效期短,使用率低的试剂,应小包装,包装,可每次都是采取,以避免重复冻融破坏试剂引起的。
 
在Elisa试剂盒的使用过程中常见问题有很多如, 加样器不确;尤其10ul以下的加样器,对结果影响很大;  保温设备不良;  洗涤用水不规范。
如何解决这些问题呢:
1在使用过程校正加样器;10ul以下加样器采用进口产品(芬兰、法国等);
2 仔细校正温度到37℃,水浴箱为佳;  
3 必须使用去离子水或蒸馏水,不得用自来水、矿泉水等; 
4 认真阅读使用说明书。  
 
样品加样:  
1 加样不准确;  2 没有混匀。  加样时一定要仔细。加样后,再检查,以防漏加、错加。  
2 加样后,反复抽吸3次混匀,防止血清聚集孔底,导致非特异性吸附。  洗涤  洗涤不*  ①每次注水洗涤,应静止30秒钟;②选用吸水纸作为衬垫,每次洗涤后扣干孔内水分; 
3 可选用塑料洗涤瓶。  加酶反应 漏加 滴加后,认真检查各孔  结果判断  ①包括阴性对照孔在内,各孔显色普遍偏深;②包括阳性对照在内,各孔均无显色;③阳性对照不显色,而其它样本显色正常; 
4 有些标本显色不深,判断阳性困难。  ①可能是洗涤不充分;加样过量;温育时间过长温度过高;按说明书重新操作。如无改善, 可与生产厂家联系;②可能是漏加样本或酶液;温育时间过短温度过低;试剂保存不当活性下降;按说明书重新 操作。如无改善,可与生产厂家联系;③阳性对照漏加、错加或失效。重新操作。如无改善,可与厂家联系,索要对照品; ④重新操作。使用酶标仪,测定光吸收度,按P/N值标准判断。  ELISA试剂盒保存 保存不规范 一定要在2-8℃存放。不得过高,也不得冻存(冻存后,酶液将失效)。  对照品 对照品为冻干品 按对照管标示,加入相应体积的去离子水或蒸馏水复溶,充分溶解混匀。可按说明书使用。
 
   上海恒远生物是一家专业代理Elisa试剂盒、生物试剂、血清、抗体、标准品对照品、培养基、细胞公司,主要销售Elisa试剂盒和生物试剂,上海恒远公司服务理念:“一切以诚信为本,一切以用户价值为依归!为顾客提供全面售前、售中、售后服务”。
 
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