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恒远教您如何减少实验误差小妙招
更新时间:2021-01-22      阅读:960

     ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。该法适于测定细胞培养上清、血清、血浆及组织液中的样本,干扰小可以测到每毫升纳克水平的细胞因子(或受体)的水平。在这种测定方法中有3种必要的试剂:

   ①固相的抗原或抗体。
   ②酶标记的抗原或抗体。
   ③酶作用的底物。 
 
  根据ELISA试剂盒的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。 
   (一)双抗体夹心法。
   (二)双位点一步法。
   (三)间接法测抗体。
   (四)竞争法。
   (五)捕获法测IgM抗体。
   (六)应用亲和素和生物素。
 
   ELISA试剂盒普遍用作非放射性同位素的成键化验. 在这种方法中, 通常标准配体是固定的, 通过加入溶液相受体或蛋白质来使之成键. 通过加入与受体特异性反应的抗体来定量成键的受体, 而且初抗体的量以加入第二种能显色的抗体测量. 第二种抗体能识别抗体的末端, 在其末端的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发生反应, 从而使溶液显色。
 
   操作注意事项
  1.ELISA试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶*溶解后再使用。
  2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
  3.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 
  4.所有液体组分使用前充分摇匀。 
 
 
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