酶标板在酶联免疫吸附实验中,参与免疫学反应的抗原、抗体、标记抗体或抗原的纯度、浓度和比例;缓冲液种类、浓度和离子强度、pH值和反应温度、时间等条件起着关键作用。包被酶标版所用的抗体量,我们是可以用公式计算出来的。公式:V=5n/a(单位:ul),a:抗体浓度,n:酶标板数量。
做ELISA实验时,大家都知道样本要进行一定比例的浓度稀释,且稀释太低或太高都会导致线性关系就不理想,结果也就不准了。那么,如何从标准曲线中通过样本的吸光度计算样本中的蛋白含量?方法很简单,只需三步骤,轻轻松松搞定。
1 设立标准品,以不同浓度标准品的吸光度为纵坐标,浓度为横坐标建立坐标系,求出曲线方程y=ax+b,
2 得出回归方程 x=(y-b)/a
3 所得样品吸光度代入方程即可取得所检测的浓度
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