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在线咨询:间接ELISA实验结果为何不显色?
更新时间:2016-12-29      阅读:1408

    昨天下午,我公司收到一位客户对实验的咨询留言。这位客户说道:“初次做间接ELISA,做了几次结果都没有显色,原因在哪里呢”
   

    收到留言后,吴为客户安排技术去。针对问题描述,上海恒远技术员分析出为何间接ELISA没有显色,可能原因有这几个方面:

1.包被原:包括你的包被液有无问题,有没有配错。包被原一般加100微升,37度2小时;

2.封闭:封闭液用的是否适合?你说做了几次都没显色,空白孔也不显吗?如果空白也无颜色,那封闭就没有问题。一般封闭是200微升每孔,也可以满孔封闭

3.一抗:检查你的一抗是否失效。是否是在37度反应

4.二抗:底物,底物缓冲液……这些都要好好检查!

5.洗涤:用PBST洗涤,包被和封闭时洗板3次;一抗二抗洗涤5次,每次间隔3分钟。
                     

    手工和机器洗涤没什么不同,就是省力一些。洗5次不会有负影响,在一抗和二抗洗涤过程中,恰恰需要多洗几次,这样有助于减少非特异性吸附。

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