昨天下午，我公司收到一位客户对实验的咨询留言。这位客户说道：“初次做间接ELISA，做了几次结果都没有显色，原因在哪里呢”
   

    收到留言后，吴为客户安排技术去。针对问题描述，上海恒远技术员分析出为何间接ELISA没有显色，可能原因有这几个方面：

1.包被原：包括你的包被液有无问题，有没有配错。包被原一般加100微升，37度2小时；

2.封闭：封闭液用的是否适合？你说做了几次都没显色，空白孔也不显吗？如果空白也无颜色，那封闭就没有问题。一般封闭是200微升每孔，也可以满孔封闭

3.一抗：检查你的一抗是否失效。是否是在37度反应

4.二抗：底物，底物缓冲液……这些都要好好检查！

5.洗涤：用PBST洗涤，包被和封闭时洗板3次；一抗二抗洗涤5次，每次间隔3分钟。
                     

    手工和机器洗涤没什么不同，就是省力一些。洗5次不会有负影响，在一抗和二抗洗涤过程中，恰恰需要多洗几次，这样有助于减少非特异性吸附。

    源自*的酶联免疫技术上海恒远生物科技有限公司，涵盖国内外专家的经验与智慧。采用*的技术和设备，确保品质的同时，降低成本，为更多有需要的研究人员，节省实验经费，保证实验质量，为国家的科技发展多做贡献。多家生物科研基地合作伙伴，实力团队倾力打造专注于elisa试剂盒的生产，研发，助力您的科研试验!